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在体内直接使用 CRISPR-Cas9 是一个重大飞跃，但也面临着很多技术挑战与安全隐患。
当地时间 2020 年 3 月 4 日，跨国制药公司 Allergan（艾尔建）和全球领先的基因组编辑公司 Editas Medicine 联合宣布，CRISPR 疗法 AGN-151587（EDIT-101）治疗莱伯氏先天性黑蒙症 10 型（Leber congenital amaurosis 10，LCA 10）的 I/II 期临床试验已完成首例患者给药。3 月 5 日，《自然》杂志（Nature）也在官网刊登了这则新闻。
雷锋网了解到，这一实验名为 BRILLIANCE，由美国俄勒冈健康与科学大学遗传性视网膜疾病专家马克·彭勒斯与 Editas Medicine 等公司合作开展，旨在利用该技术删除引发 LCA10 的 CEP290 基因中的一个突变。
据悉，LCA 10 是一种比较罕见的常染色体遗传性视网膜病变，发病率在万分之三左右。该疾病常在人的幼年期发病，出生时或出生后一年内双眼视锥细胞功能完全丧失，导致婴幼儿先天性失明。
同时，LCA 10 由 CEP290 基因突变引起，而最常见的 LCA10 突变位点是该突变基因中的 IVS26，位于内含子 26 内的腺嘌呤至鸟嘌呤点突变，这一突变会产生新的剪接供体位点，导致转录提前终止。
实际上，目前科学家已经发现有多个基因突变导致的不同类型 LCA，而对于不同类型的 LCA，治疗方法自然也不同。
2017 年 12 月 10 日，美国食品药品监督管理局批准了美国生物技术公司 Spark 的 AAV（腺相关病毒）基因疗法，即通过 AAV 将正确的 RPE65 基因递送到视网膜细胞，从而治疗 LCA 2。该疗法是美国食品药品监督管理局批准的首个基因疗法。
不过，传统的基因疗法（利用病毒，将突变基因的健康版本插入受影响的细胞中）明显不适用于 LCA 10 的治疗——引起 LCA10 的突变基因 CEP290 编码序列长 7.5kb，远超 AAV 的包装能力极限 4.7kb。正如宾夕法尼亚大学研究视网膜疾病的 Artur Cideciyan 所说：
CEP290 太大，无法将整个基因植入病毒基因组。
实际上，Editas Medicine 公司由美国麻省理工学院终身教授、基因编辑大神张锋博士创建，张锋博士曾因发展、应用基因修饰技术 CRISPR-Cas9 率先获得了美国专利，并被视为诺贝尔奖的热门人选之一。
面对 LCA 10 这一难以攻克的疾病类型，Editas Medicine 公司推出了 CRISPR 基因编辑疗法：
2018 年 12 月 1 日，美国食品药品监督管理局接受了 Editas Medicine 递交的新药研究（Investigational new drug, IND）申请，允许其开展利用 CRISPR 手段治疗 LCA10 的临床试验；
2019 年 1 月 23 日，Editas Medicine 在顶级医学期刊 Nature Medicine 上发表了研究成果：使用编号为 EDIT-101 的 CRISPR/Cas9 基因疗法，去除由 CEP290 基因中的 IVS26 突变产生的异常剪接供体，从而恢复正常的 CEP290 基因表达，成功恢复患者视力；
2019 年 7 月 25 日，Editas Medicine 和 Allergan 共同宣布，正式启动 CRISPR 疗法 AGN-151587 (EDIT-101) 的 I/II 期临床试验，并招募 18 名 LCA10 患者，验证该疗法的安全性、耐受性及疗效；
2020 年 3 月 4 日，Editas Medicine 和 Allergan 共同宣布，该临床试验完成了首例患者体内给药，AGN-151587 也是全球首款在患者体内给药的 CRISPR 基因编辑疗法。
具体来讲，上述基因疗法原理如下：
使用 AAV5 载体通过视网膜下注射，将 saCas9 和 CEP290 特异性 gRNA 递送至感光细胞，通过双 gRNA 分别靶向突变内含子区域的上下游，将突变内含子区域整体删除或倒位，从而恢复 CEP290 基因的正常表达。
此外雷锋网也了解到，18 名入组患者包括成年患者和 3-17 岁的患者，患者的一只眼睛将接受一剂 AGN-151587 的视网膜下注射，入组患者或被分为 5 个队列，接受 3 种不同剂量用药。
对此，Editas Medicine 公司总裁兼 CEO Cynthia Collins 也表示：
BRILLIANCE 项目临床试验中的首例患者给药，是实现 CRISPR 药物治疗毁灭性疾病潜力的重要里程碑。
实际上，基因是生物的遗传密码。而当基因出现缺陷的时候，基因编辑技术便应运而生。
所谓基因编辑技术，即我们通常所说的 CRISPR 技术，可以理解将基因组中的错误位点基因进行“修改”，使人体细胞恢复正常机能。有人形象地将其称为“基因魔剪”，认为基因编辑就是用附带了“导航仪”的基因剪刀对基因进行修饰。
据《自然》杂志刊登的文章称，此次并不是第一次在人体中尝试基因编辑。
此前，美国加州生物制药公司 Sangamo Therapeutics 针对一种名为 Hunter's syndrome 的代谢疾病使用了锌指核酸酶（zinc-finger nucleases）基因编辑疗法，并进行临床试验。
雷锋网注意到，基因编辑技术已在疾病防治、农业、养殖业、能源等方面广泛应用，其意义不容小觑。
然而，这项技术却也被认为是一种“被禁止的科技”。
2016 年 8 月 Pew Research Center survey 的一项调查就显示，对于基因编辑等一系列能对人类进展产生重大改变的生物技术，美国民众的态度并不如想象的乐观。同时也有不少伦理学家认为基因编辑会带来难以预期的影响（比如未来可能会出现类似“超人”一样的物种），可能会加剧社会不公平。
2018 年 11 月 26 日，第二届国际人类基因组编辑峰会召开前一天，南方科技大学生物系副教授贺建奎宣布，一对基因编辑婴儿已于 2018 年 11 月健康诞生。
这自然是“世界首例”、是历史性突破，不过也掀起了关于科学研究伦理的滔天巨浪，多所著名大学和研究机构的 100 多名科学家更是发表联合声明，表示坚决反对与谴责。最终，贺建奎等人因逾越科研和医学伦理道德底线，被依法追究刑事责任。
因此，对于此次的体内 CRISPR 基因编辑临床试验第一例患者给药，专家也难免表现出担忧，正如加州大学伯克利分校研究基因组编辑的 Fyodor Urnov 所表示：
就目前而言，CRISPR-Cas9 直接应用于人体，与在培养皿中处理细胞相比，是一个重大的飞跃，但这更像是太空飞行，而不是常规的飞机旅行。它面临的更多是技术限制和人们对安全的担忧。
参考资料：
https://www.nature.com/articles/d41586-020-00655-8
https://www.editasmedicine.com/wp-content/uploads/2018/10/16.pdf
http://www.medsci.cn/article/show_article.do?id=e2e3189596e1
https://mp.weixin.qq.com/s/N-z6YkNhrVAN5PpW8jmHcw
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